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蛋白浓缩方法
作者: 来源:丁香园 2014-03-12

  

 

  蛋白浓缩方法基本有:

  丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法……

  1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。

  2,免疫沉淀法:得有特异性抗体!

  3,硫酸铵沉淀法:利用高浓度盐将蛋白质析出(盐析)

  选择硫酸按是因为:盐析有效性,pH范围广,溶解度高,溶液散热少,经济!

  4,(低温)有机溶剂沉淀法:强调低温(0-4度以下)是因为10度时蛋白会在有机溶剂中变性,可用乙醇,丙酮……注意:Mg2+离子,pH值

  5,聚乙二醇沉淀法:使用PEG时旨在个别情况下才会是蛋白质稍有变性!他溶解是散热低,形成沉淀的平衡时间短,通常达到30%时蛋白质就会达到最大量的沉淀!

  6,超滤法:主要针对小体积蛋白质溶液(几ml)此法更不易引起变性!不过得有浓缩器,不是哪个实验室都有的!

  

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  7,透析法:主要用于更换蛋白质的缓冲液!的有透析袋!不需要特殊的仪器!

  8,离子交换层析:可用阴离子交换树脂进行浓缩!

  9,冷冻干燥法:在冷冻状态下让扬品种的液体升华

  具体你的实验应该是做一种分泌蛋白吧?

  浓缩后要干什么,需要活性蛋白么?

  实验室设备如何,导师经费如何?

  这些都要考虑!!